Перейти к содержанию

YetAnotherShroomer

GRIBO-ПОЛЬЗОВАТЕЛИ
  • Публикаций

    1
  • Зарегистрирован

  • Посещение

Репутация

3 Обычный

Информация о YetAnotherShroomer

  • Звание
    Newcomer
  1. Привет, в этом треде хочу делиться своим первым опытом выращивания гегантских плебсобициновых вешенок. Сразу обозначу, что какими-либо глубокими знаниями в сабже не обладаю, мой опыт ограничивается несколько недельным чтением различных мануалов и грибных форумов. Информацию в основном забирал по пендосским методичкам, тут подсмотрел то, чего не нашел там - процесс фруитинга и замену некоторым буржуйским расходникам, которые у нас найти сложно, поэтому некоторые теки могут показаться непривычными для нашего человека, хотя и были замечены в использовании на форуме (SAB, агар, овес, отказ от антибиотиков) Давеча заказал "три в одном" (за 1 с хвостиком килорубль) отпечатка кубенсиса стрейнов GT, PB, LK. Принты пришли в ужасном состоянии (PB жирный и бесформенный, LK почти невидимый, GT выглядел лучше всех при этом все еще похожим на принт, по которому хорошенько попрыгал, а потом еще и поплевал очень добросовестный работник почты россии) Начал с того что соорудил SAB (still air box - коробка со спокойным воздухом) в качестве рабочей площадки многократно снижающей шансы подхватить споры и бактерии из окружающей среды. Коробка оказалось маленькой и работать в ней сложно, и в перспективе её нужно будет переделывать. Банки например в неё не лезут, ставлю их на полотенце и уже после этого накрываю сверху коробкой, после чего уже начинаю мероприятия по обеззараживанию поверхностей. Перед работами опрыскиваю из распылителя внутренний объем своего SAB обычной водичкой, потом различными обеззараживающими растворами, чтобы те споры что в данный момент находятся в воздухе осели на дно (на влажное полотенце) SAB с содержимым: Далее из миниатюрных пищевых контейнеров смастерил импровизированные чашки петри, купить нормальные помешала (не)здравая паранойя - на почту заказывать их не хотелось, местные продаваны продают по предварительным заказам посредством созванивания. Как оказалось, работать с ними вполне себе сносно получается - разве что они крупноваты по сравнению со своими правильными братьями и имеют непрозрачную крышку, так что разглядывать содержимое приходится под углом. От использования антибиотиков было решено отказаться: как было мной замечено зарубежные ребята ими в большинстве своем не пользуются, по большей части для всех стерилизационных нужд напрягая горелку и скороварку, при этом имея минимальную статистику заражений (у отдельных гайдописателей по их заявлениям 1% ЧП заражаются). В горелке я тоже нужды не почувствовал - вместо инокуляционной петли я использовал обычную стерильную вату (её конечно в отличии от петли остается только ткнуть в центр, мазки по нужному паттерну ей не сделаешь), вместо режущих инструментов которые стерилизуются огнем в дальнейшем собираюсь использовать одноразовые зубочистки, простерилизованные в скороварке. На данный момент работы с разрезанием агара производил одним единственным стерилизованным в скороварке ножом, что не очень умно - многократное использование инструмента, хоть и протираемого различными спиртами, уменьшает риск набрать на его лезвие различных инфекций и заразить всю питательную среду в лаболатории, но все таки делает шансы зафакапить все очень высокими. Т.к. нормального спирта найти не получилось стерилизовал все множеством жидкостей поочередно: спирт 40% (водка), хлоргексидин, салициловая к-та, снова водка, спирт 60-70% (в виде геля для очищения рук) и так по каждому инструменту после каждого применения. Все рабочие инструменты кроме перчаток предварительно так же полежали в скороварке Первоначально некоторый объем мицелия было решено вырастить на агаре, преимущества заражения агара перед заражением зерна спорами/взвесью следующие: - возможность отделять контаминации от чистого мицелия Агар заливается тонким слоем и отлично подходит для визуального наблюдения здоровья мицелия путем просвечивания источником света через него, четко видны тонкие гифы, контаминации, удачные участки мицелия для пересадки. Если вдруг где то растет плесень, можно сделать отсадки мицелия в другие контейнеры, можно выбросить содержимое и отправить контейнер на стерилизацию не потратив много времени и зерна. К моменту посадки в банку на зерно ты точно будешь уверен, что мицелий у тебя чистый - контроль Отделяем самые лучшие куски мицелия, селективно получаем самый ризоморфный, самый быстрорастущий/etc мицелий. Достаточно покрытый мицелием участок агара срезать стерильным инструментом и бросить в контейнер с чистым агаром. Так же можно и часть плодового тела на агар поместить, произведя так называемое клонирование (насколько я понял не сильно отличается от пересадки мицелия, возможно опытные грибоводы меня поправят) - хранение агара агаровая питательная среда хранится в холодильнике продолжительное время. В том числе и с мицелием. Если нет нужды переезжать, то можно вообще не пользоваться споровым материалом для новых посадок, периодически раз в несколько месяцев пересаживая мицелий на новую среду. Пишут, что в отдельных случаях между пересадками мицелий способен около года в холодильнике прожить. - слабая прочность при перетряхивании Первый раз при колонизации (?если правильно употребляю термин?) трясешь банку с агаровой пластинкой - он разлетается на много-много маленьких кусочков и получается множество очагов заражения, что ускоряет зарастание банки. В моем случае этого не получилось - я поостерегся трясти слишком сильно, чтоб не травмировать зерно (хотя в перспективе оно должно быть стерильным, т.к. обрабатывалось в скороварке), так что агар надорвался, но уцелел. Тем не менее несколько очагов заражения все таки стартнули. основной недостаток агара: -время можно смело прибавлять к своему грову 2-3 недели, если начинать процесс из спорового материала Возвращаясь к процессу - было две попытки заражения агаровых составов: 1) Четыре импровизированных чашки петри (ИЧП) с простерилизованным в скороварке агаром - 2 из сухого кошачьего корма, остальные из картофельных хлопьев и мизерного количества меда. Заражал шприцом с бутилированной водой, перевел целый принт ГТ (фото не осталось). Спор в шприце не было видно несмотря на то что принт был более менее жирным, зато насадка для иглы на следующий день после всасывания была покрыта чем то черным, похожим на споры (хотя это мог нагар со свечи осесть), возможно их туда каким то образом вытянуло из жидкости в шприце, хотя шприц и лежал горизонтально в фольге в холодильнике. Так же допустил ошибку вбахивая содержимое шприца в каждую из ИЧП в больших объемах т.е. по 2.5 мл воды в каждую вместо одной капельки. Через неделю агар выглядел все так же стерильным, а по его поверхности плескалась тонким слоем желтоватая жидкость, которая, как оказалось, при вскрытии ИЧП имела ужасный аромат. ИЧП были очищены от содержимого и направлены на мытье и повторную подготовку агара. 2) Три ИЧП с агаром из картофельных хлопьев. Использовал для заражения стерильные ватные палочки и просто стерильную вату (т.к. её гораздо проще достать, стерильные ватные палочки в аптеках не продаются и мне просто повезло, что они оказались под рукой), спор перевел по минимуму - где то ~5мм^2 от отпечатка, во всех трех тестовых контейнерах через 4-5 дней споры проснулись и сперва превратились в небольшие деформации на агаре, а потом из них получились пушинки. Мицелий рос ОЧЕНЬ пушистым (т.е. все гифы наружу вертикально или почти вертикально вверх), сперва показалось что это плесень, и я на пару дней пустился в расследование, пока не опроверг вариант с ней. На просвет гифов видно не было. На забугорном шрумери ничего подобного тоже видеть не приходилось. За неделю-полторы обросло, плюс сформировались маленькие захудалые гифы, наиболее крупные из которых я решил пересадить. После пересадки решил понюхать пустые контейнеры - они действительно имели ОЧЕНЬ грибной запах. Две изначально зараженных спорами пушистых агаровых пластинки ушли в банки с зерном, оставшаяся пошла на трансферы (вырезал из неё участок с наиболее толстыми гифами). Контейнер с вырезанными ризоморфами сохранил (чекнуть не заразится ли мицелий после таких манипуляций, да и сколько он вообще проживет и насколько глубоко обрастет). С мицелием на данный момент все в порядке, в некоторых местах выросли новые толстые гифы и полезли карабкаться по вертикальной стенке контейнера в поисках пожрать. Контейнер который отправлялся на трансферы: Как видно контейнеры, куда был пересажен ризоморфный мицелий начали зарастать толстыми гифами (контейнер а зарастает быстро, контейнер б зарастает толстенными гифами, но не так быстро). Фото 4 дня после трансфера: Так же банки с овсом 4 дня после колонизации(?) (прим. - трансфер и колонизация производились примерно в один временной промежуток). Большой желейный кусок это как раз вброшенная в банку и перетряхнутая (агар не очень прочный, поэтому разлетается по всей банке, что вызывает множественные очаги роста) один раз агаровая пластинка. Овес промыл, потом отправил вариться на срок около 30 минут, далее засунул в скороварку на 2 часа при давлении 70 кПа. Как видно на фото, мицелий и без дополнительной селекции пошел крупными красивыми ризоморфами. Банки 4 день после колонизации(?): На данный момент все растет довольно быстро без признаков заражения, не смотря на не самые аккуратные условия работы, основное опасение, что грибы могут быть не те, т.к. покупались в той еще клоаке у сомнительных личностей (опять же паранойя подсказала не срать своими данными там где буду обитать/ненадолго задерживтаься проходя мимо).
×
×
  • Создать...